909 AMINOSPureza vs. contenido medido: dos preguntas distintas en un certificado
La pureza por HPLC indica qué parte del material detectado por el método es el compuesto buscado; el contenido medido indica cuántos miligramos de ese compuesto hay realmente en el vial.
- Pureza (HPLC, % de área): la proporción del pico buscado en la respuesta del detector, no el porcentaje del peso del vial.
- Contenido: cuánto compuesto hay realmente en el vial, en mg.
- Una muestra puede ser muy pura y contener un poco más o menos de lo indicado en la etiqueta.
- Lote TESA-2609A: pureza de 99.22%; 10.28 mg medidos en un vial de 10 mg.
Un certificado de análisis suele informar dos cifras que se parecen pero responden preguntas distintas:
- Pureza: de lo que detectó el método, ¿qué parte es el compuesto buscado?
- Contenido medido: ¿cuánto del compuesto hay realmente en el vial?
Una muestra puede obtener un valor alto en una y distinto en la otra. Leerlas juntas, junto con cada especificación, da una imagen más completa que cualquiera de las dos por separado.
Pureza (HPLC, % de área)
La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) separa los componentes de una muestra a medida que pasan por una columna. Un detector registra cada componente como un pico.
- La pureza por % de área es el área integrada del pico del compuesto buscado como proporción del área total integrada de los picos, en las condiciones del método (columna, fase móvil, longitud de onda de detección).
- El área de un pico es respuesta del detector, no masa. Sustancias distintas pueden responder de forma distinta a la misma longitud de onda, por lo que el % de área no es una fracción en masa (% en peso) de la muestra.
- Describe la composición relativa de lo detectado y no mide el peso del material en el vial.
- Lo que el detector no registra en esas condiciones no entra en el cálculo. Eso incluye el agua, los contraiones (sales) y algunas sustancias que no absorben luz UV.
Contenido medido
Un resultado de contenido informa una cantidad: mg del compuesto por vial, a menudo también como porcentaje de la cantidad indicada en la etiqueta ("cantidad declarada"). Una especificación de contenido puede fijar un límite inferior, uno superior o ambos (por ejemplo, un rango alrededor del 100% de lo declarado). El certificado indica cuál se aplica.
Por qué pueden diferir
- La pureza mide proporciones; el contenido mide cantidad. Una muestra puede ser muy pura y aun así contener algo más o algo menos de lo indicado en la etiqueta. La cantidad envasada, y los contraiones y el agua presentes en los materiales liofilizados, afectan al contenido pero no a la pureza.
- Los métodos varían según el laboratorio. Algunos laboratorios informan el contenido con el mismo método cromatográfico. Otros informan un "contenido neto de péptido" determinado con otra técnica, por ejemplo análisis de nitrógeno o de aminoácidos. Lea siempre el método junto a la cifra.
Ejemplo: lote TESA-2609A
Del certificado de KMD Analytical para Tesamorelin, lote TESA-2609A (certificado 9AL-20260921-C7PG-01, emitido el 29 sep 2026):
| Método | Resultado | Especificación |
|---|---|---|
| HPLC-DAD: pureza (% de área) | 99.22% | ≥ 95.0% |
| HPLC-DAD: contenido por vial | 10.28 mg (102.8% de lo declarado en la etiqueta) | ≥ 90% de lo declarado (10 mg) |
Leídos juntos:
- El resultado de pureza de este lote (99.22%): el pico del compuesto buscado representó el 99.22% del área total integrada de los picos que detectó este método de HPLC. Es una proporción de la respuesta del detector, no de la masa.
- Contenido de 10.28 mg: el laboratorio informa 10.28 mg de péptido neto en el vial, es decir, el 102.8% de los 10 mg de la etiqueta.
- Ambos resultados se informan junto a sus especificaciones, y ambos las cumplen. Para el contenido, este certificado solo fija un límite inferior (≥ 90% de lo declarado). El certificado indica que el conjunto de especificaciones está definido por el cliente y el método.
El certificado hace la misma distinción que esta página. Señala que la pureza no mide el contenido en masa de péptido neto (péptido frente a contraión, agua o disolvente residual), y que este se informa por separado como contenido por vial. También informa la identidad ("Identity Conforms (RT + UV vs. reference)"): el tiempo de retención y el espectro UV de la muestra coincidieron con la referencia.
Lista de comprobación para cualquier certificado
- ¿Se informan tanto la pureza como el contenido, y se indica el método de cada uno?
- ¿Cada resultado tiene una especificación al lado, y el certificado dice quién la fijó?
- ¿El contenido se expresa como cantidad (mg) y como porcentaje de lo declarado, y su especificación fija un límite inferior, uno superior o ambos?
- ¿El certificado nombra el laboratorio emisor, su número de certificado y el lote, y ese lote coincide con el vial?
- ¿Está disponible el documento original del laboratorio, para comprobar las cifras en la fuente?
Un certificado solo informa las pruebas que enumera, para la muestra analizada del lote indicado. No describe otros lotes ni pruebas que no se realizaron.
Preguntas frecuentes
¿Qué mide la pureza por HPLC (% de área)?
La proporción del pico buscado sobre el área total integrada de los picos que detectó el método. Es una proporción de la respuesta del detector, no el porcentaje del peso del vial.
¿Por qué una muestra muy pura puede contener más o menos de lo indicado en la etiqueta?
La pureza es una proporción y el contenido es una cantidad. La cantidad envasada, y el agua y los contraiones presentes en un material liofilizado, cambian el contenido sin cambiar la pureza por % de área.
¿Qué es el contenido neto de péptido?
La cantidad medida del propio péptido, informada en miligramos por vial, distinta de los contraiones y el agua. Los laboratorios la miden con técnicas diferentes, así que lea el método junto a la cifra.
¿Qué informó el certificado del lote TESA-2609A?
Pureza de 99.22% por % de área de HPLC (especificación ≥ 95.0%) y 10.28 mg por vial, el 102.8% de los 10 mg declarados en la etiqueta (especificación ≥ 90%). Ambos resultados cumplieron sus especificaciones.
Fuentes
- Certificado de KMD Analytical 9AL-20260921-C7PG-01 (lote TESA-2609A), PDF original
- ICH Q2(R2) Validation of Analytical Procedures (página de guía de la FDA de EE. UU.)
Las fuentes se citan como referencia. Sus editores no han revisado ni respaldado esta guía.
Solo para investigación de laboratorio. No apto para uso humano ni veterinario. No aprobado por la FDA.
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